توضیحات
آماده سازی محیط
- قوطی محیط کشت ام وای پی آگار را به خوبی تکان دهید. مقدار ۲۱/۵ گرم از پودر محیط را در ۴۵۰ میلی لیتر آب مقطر حل کنید. به آرامی حرارت دهید تا محیط کاملا حل شود.
- در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
- پس از خنک شدن محیط و رسیدن دمای آن به ۵۰-۴۵ درجه سانتی گراد، محتوای ۱ ویال از ساپلمنت باسیلوس سرئوس (iS47004) را در ۵ میلی لیتر آب مقطر حل کنید و با عبور از فیلتر ۰/۲۲ میکرومتری به صورت استریل به محیط اضافه کنید.
- مقدار ۵۰ میلی لیتر امولسیون زرده تخم مرغ (iS47020) را به صورت استریل به محیط اضافه کنید.
- محیط را به خوبی هم بزنید و در پلیت بریزید.
شرایط نگهداری
پودر محیط داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.
آزمایش
آزمایش
فرآیند آزمایش
- قبل از تلقیح، سطح پلیت محیط کشت را خشک کنید.
- نمونه غذایی را در بافر مناسب یا محیط کشت پپتون واتر (i23137) رقیق کنید.
- حدود ۰/۱ میلی لیتر از نمونه رقیق شده را با اسپرِدِر شیشه ای استریل در سطح پلیت پخش کنید.
- پلیت ها را در دمای ۲±۳۰ درجه سانتی گراد به مدت ۴۰-۱۸ ساعت گرماگذاری کنید.
نتیجه و تفسیر
کلنی های باسیلوس سرئوس بر روی محیط MYP Agar به رنگ صورتی/ارغوانی، با ظاهری خشن و خشک است که حلقه ای از رسوب متراکم (ناشی از تاثیرِ آنزیم لسیتینازِ باکتری بر روی لسیتین زرده تخم مرغ) آن را احاطه کرده است. برای شمارش پلیت کانتِ باکتری از کلنی هایی با همین ویژگی ها استفاده می شود. کلنی هایی که با هاله ای بی رنگ یا به زردرنگ احاطه شده اند، باسیلوس سرئوس نیستند.
کلنی های رشد کرده بر روی محیط MYP Agar که به عنوان باسیلوس سرئوس درنظرگرفته می شوند باید توسط تست های تاییدی بعدی مورد بررسی قرارگیرند.