نئومایسین یک آنتی بیوتیک آمینوگلیکوزیدی است که از Streptomyces fradiae استخراج شده است. نئومایسین یک آنتی بیوتیک با طیف عمل گسترده است که در برابر باکتری های گرم مثبت و گرم منفی فعال است. این آنتی بیوتیک ترکیبی از نئومایسین B (فرامیستین) و اپیمر آن یعنی نئومایسین C است.
نئومایسین معمولا به عنوان مارکر انتخابی در همانندسازی ژن به کار می رود و بنابراین در محیط های کشت برای گزینش کلنی هایی که ژن مقاومت به نئومایسین در ژنوم آنها درج شده است، استفاده می شود.